فیلتراسیون  و Degasser

فاز متحرکی که در دستگاه HPLC استفاده می شود مایع است برای فاز متحرک کروماتوگرافی فاز معکوس می توانیم از حلال های آلی، آبی و بافرها استفاده کنیم؛ اما باید توجه داشته باشیم که این حلال ها حتما باید گرید HPLC باشند بعد از اینکه حلال گرید HPLC تهیه شد لازم است که آنها را فیلتر کنیم.

سه مرحله برای آماده سازی حلال های مورد استفاده در دستگاه کروماتوگرافی مایع داریم.

1-ست فیلتراسیون

برای فیلتراسیون فاز متحرک دستگاه HPLC از ست فیلتراسیون استفاده می شود. ست فیلتراسیون از سه قسمت شیشه ای، صافی و پمپ تشکیل شده است.

فیلترهایی که برای فیلتر کردن فاز متحرک استفاده می کنیم جنس های مختلفی دارند.

حلال های مورد استفاده در HPLC هم حلا ل های آبی هستند هم حلال های آلی؛ وقتی حلال آبی استفاده می کنیم جنس صافی نایلون و PVDF می تواند باشد و اگر حلال آلی استفاده می کنیم جنس صافی نایلون و PTFE  می تواند باشد بنابر این برای کاهش هزینه ها بهتر است از فیلتر نایلون استفاده کنیم که برای هر دو حلال آبی و آلی کارایی دارد.

جنس صافی مورد استفاده ما معمولا نایلون 45/0 میکرون با قطر 47 میلی متر است.

به کمک مکشی که پمپ خلا ایجاد می کند، حلال صاف می شود و عاری از هرگونه ذرات می شود.

بعد از اینکه حلال صاف شد و روی ست از قسمت مخزن به ارلن زیر صافی منتقل شد پمپ را جدا می کنیم و سپس حلال داخل ارلن رو به ظرف مخصوص حلال که سر دستگاه قرار می گیرد منتقل می کنیم.

2- Degasser

در هنگام انتقال حلال صاف شده به ظرف مخصوص، از آنجایی که در معرض هوا قرار دارد ممکن است اکسیژن جذب شود و حباب هوا در حلال ایجاد شده باشد بنابراین ظرف حاوی حلال را با درب باز داخل دستگاه التراسونیک گذاشته و به مدت 3 الی 4 دقیقه سونی کیت می کنیم تا مطمین شویم گاززدایی انجام شده است.

3-فیلتر سر مسیر حلال

در نهایت یک فیلتر سر مسیر حلال هم که از درب ظرف رد کردیم داخل حلال قرار می هیم. این فیلترها از جنس فولاد ضد زنگ و برخی از جنس شیشه هستند و اگر حلال در طول روزی که کار می کنیم به مرور با ذرات گرد و غبار آلوده شود فیلتر اجازه نمی دهد حلال آلوده وارد دستگاه شود.

بسته به برنامه آزمایشگاهی، هر ماه یک بار خود این فیلترها باید تمیز شوند.

تمیز کردن فیلتر به این صورت است که فیلتر را به مدت 1 الی 2 ساعت داخل اسید نیتریک غلیظ می جوشانیم. سپس در آب دیونیزه  یا آب  upقرار داده و در دستگاه التراسونیک چند دقیقه سونی کیت(sonicate)  می شود تا اسیدها از فیلتر کاملا خارج شوند.

برای تسلط به دستگاه HPLC می توانید از طریق سایت علاء الدین شو در دوره حضوری تثبیت مهارت شرکت کنید. و این فرصت را داشته باشید که پس از آزمایش 3 روز خودتان با دستگاه کار کنید تا ماهر و مسلط شوید. کار نیکو از پر کردن است.علاء الدین شو؛ حرفه ای شو؛ با موضع قدرت وارد بازار کار شو.

با تشکر از همکاری مدیریت محترم و همکاران حرفه ای و توانمند شرکت کیان شار دانش